4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranosidum CAS:200422-18-0

Effectus: ONPG est substratum adhibitum ad praesentiam et actionem enzymi β-galactosidasis detegendam. Cum enzymum β-galactosidase praesens et activum est, ONPG in duo producta findit: o-nitrophenolum et derivatum galactosi. Liberatio o-nitrophenoli mutationem coloris flavescentis efficit, quae spectrophotometro metiri potest.

Usus: ONPG plures usus in biologia moleculari et investigatione biochemica habet:

Determinatio activitatis β-galactosidasis: ONPG vulgo adhibetur ad activitatem enzymi β-galactosidasis metiendam et quantificandam. Celeritas formationis o-nitrophenoli, quae directe proportionalis est activitati enzymi, spectrophotometrice metiri potest.

Expressio et regulatio genorum: ONPG saepe in experimentis ad studia expressionis et regulationis genorum pertinentibus adhibetur. Saepe in probationibus proteinorum fusionis, ut in systemate fusionis lacZ vulgo adhibito, adhibetur ad expressionem genorum sub imperio promotorum specificorum investigandam. Actio beta-galactosidasis per ONPG mensurata perspicuitatem in gradum expressionis genorum praebet.

Examen activitatis β-galactosidasis: ONPG adhiberi potest ut methodus colorimetrica examinationis in technologia ADN recombinante ad praesentiam et functionem geni LacZ, quod β-galactosidasem codificat, identificandam. Haec methodus examinationis adiuvat in identificandis clonis qui genem desideratum continent.

Studia cineticae enzymorum: ONPG etiam utilis est in investiganda cinetica enzymi β-galactosidasi. Mensurando celeritatem reactionis enzymi-substrati ad varias concentrationes substrati, possibile est determinare parametros cineticos sicut constantes Michaelis-Menten (Km) et maximas celeritates reactionis (Vmax).